: NÍVEIS SÉRICOS DE ENZIMA HEPÁTICA E RENAL EM RATOS, INJETADOS COM VENENO DE BOTHROPS MOOJENI E TRATADOS COM LASER DE BAIXA POTÊNCIA

Juliana Topazio Ribeiro Fontoura; Luis Guilherme Pedroso Garcia; Marina Sousa Santos; Vania Claudia Olivon

Todos os Trabalhos

Trabalho

DOI

10.29327/113557.1-2

Título do Trabalho

: NÍVEIS SÉRICOS DE ENZIMA HEPÁTICA E RENAL EM RATOS, INJETADOS COM VENENO DE BOTHROPS MOOJENI E TRATADOS COM LASER DE BAIXA POTÊNCIA

Autores

Juliana Topazio Ribeiro Fontoura
Luis Guilherme Pedroso Garcia
Marina Sousa Santos
Vania Claudia Olivon

Modalidade

Comunicação oral (Resumo expandido)

Área temática

Empreendedorismo, Inovação e Tecnologias em Saúde

Data de Publicação

11/03/2020

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://eventos.unigran.br/anais/conins/189825---niveis-sericos-de-enzima-hepatica-e-renal-em-ratos-injetados-com-veneno-de-bothrops-moojeni-e-tratados-com-las

ISBN

978-65-86090-03-1

Palavras-Chave

veneno botrópico; parâmetros bioquímicos; laser.

Resumo

Autores: Juliana Topazio Ribeiro Fontoura, Luís Guilherme Pedroso Garcia, Marina Sousa Santos. Orientadores: Doroty M. Dourado, Vania Olivon. Afiliac¸a~o dos autores: Universidade Anhanguera Uniderp Resumo As serpentes de importância médica na América Latina pertencem aos gêneros Bothrops, Crotalus, Lachesis e Micrurus. O gênero Bothrops é responsável pela maioria dos acidentes. A OMS estima globalmente 2.500.000 picadas de cobras venenosas e 125.000 mortes anualmente. Os venenos de serpentes causam danos locais e sistêmicos, incluindo a lesão renal aguda, que é a causa mais importante de morte. O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito do veneno bruto da serpente Bothrops moojeni coletadas na região do Pantanal-MS sobre os níveis séricos de colesterol, ALT, AST e creatinina de ratos. Além disso, a partir do modelo experimental, estratégias de regeneração no músculo gastrocnêmio foram realizadas pela irradiação do laser de comprimento de onda de 630nm (Arsenieto de Gálio - VGA) no local da injeção do veneno e foi avaliada a influência desse tratamento após envenenamento sobre os parâmetros bioquímicos mencionados. Aprovado pelo Comitê de Ética do Uso de Animais UNICAMP 2640-1 Apoio: UNICAMP, Anhanguera-Uniderp Introdução Os venenos de serpentes compreendem misturas complexas que contêm numerosos compostos ativos biológicos diferentes, tais como proteínas, peptídios e nucleotídios (Ministério da Saúde). Na sua maioria, os componentes são enzimas proteolíticas que interferem em diversos mecanismos bioquímicos fisiológicos e suas ações podem ser classificadas como anticoagulantes, neurotóxicas e miotóxicas, com absorção do veneno principalmente por via linfática (MANDELBAUM 1990, DOURADO et al, 2013). Dos três tipos de ações principais (proteolítica, coagulante e hemorrágica) do veneno botrópico, a atividade “Proteolítica” é de importância fundamental para a caracterização clínica do acidente. A chamada atividade proteolítica se constitui em atividade inflamatória aguda. Equimoses, bolhas e necrose podem aparecer em dias sucessivos, dependendo da gravidade do envenenamento (DOURADO et al., 2017). De acordo com Magro e Vattimo (2007), a elevação de níveis séricos da creatinina são sinais indicativos de comprometimento nas funções renal. As enzimas aspartato aminotransferase, AST (transaminase glutâmica-oxaloacética, TGO) e alanina aminotransferase, ALT (transaminase glutâmica-pirúvica, TGP) catalisam a transferência reversível dos grupos amino de aminoácido para o a-cetoglutarato, formando um cetoácido e ácido glutâmico, atuando como uma ponte entre o metabolismo dos aminoácidos e carboidratos. A AST e ALT são enzimas intracelulares presentes em grandes quantidades no citoplasma dos hepatócitos. Lesões ou destruição das células hepáticas liberam essas enzimas para a circulação. A ALT é encontrada principalmente no citoplasma do hepatócito, enquanto 80% da AST estão presentes na mitocôndria. Esta diferença auxilia no diagnóstico e prognóstico de doenças hepáticas. Objetivo Geral: Avaliar as enzimas hepáticas e Renal de ratos Wistar injetados com veneno de Bothrops neuwiedi no músculo gastrocnêmio de ratos e tratado com irradiação por laser Arsenieto de Gálio (AsGa); Avaliar as alterações dos níveis séricos das enzimas hepáticas: ALT, AST; Avaliar as alterações dos níveis séricos da enzima renal: creatinina; Avaliar as alterações dos níveis séricos do colesterol. Os dados serão tratados estatisticamente para comparação dos resultados entre os grupos. Metodologia Para irradiação dos animais foi utilizado um aparelho de laser de Arsenieto de Gálio (AsGa/VGA), LIVM 904, com potência de pico de 45 Watts, comprimento de onda (invisível) de 904 nm e densidade de energia em J/cm². Logo após a injeção do veneno bruto (40 µg/ml) o músculo gastrocnêmio foi irradiado. A eutanásia ocorreu em 24 horas, 3, 7 e 14 dias. Em 24 h, o número de irradiações passou a ser uma vez ao dia sempre à mesma hora com dosagem de 4 joules por centímetro quadrados (4 J/cm²) por 14 dias consecutivos. O aparelho foi colocado aproximadamente a 1 cm de distância do local da injeção do veneno no músculo, sendo o mesmo procedimento para todos os animais irradiados, com irradiação controlada automaticamente pelo aparelho (1 min e 62 seg). Foram utilizados 40 ratos Wistar machos adultos, injetados i.m. com 40 µg/mL do veneno de Bothrops moojeni no músculo gastrocnemio direito (i.m.). O experimento foi realizado utilizando cinco ratos por análise (Grupo experimental, 24 horas, 3 dias, 7dias e 14 dias). Após o tempo determinado para cada um dos experimentos, os animais foram anestesiados com cloridrato de Ketamina e Xilazina via intraperitoneal (i.p.). A coleta e processamento das amostras de sangue para análises bioquímicas foram realizados utilizando o seguinte método: Amostras de sangue foram retiradas por punção cardíaca e transferidas para tubos secos (sem anticoagulantes). Após retração do coágulo, as amostras foram centrifugadas durante 10 minutos a 2000 RPM, o sobrenadante (soro) foi devidamente acondicionado, de acordo com as exigências metodológicas de cada teste. 12 horas antes foram retiradas a alimentação e água para que não houvesse alterações nas análises bioquímicas. A avaliação dos níveis de colesterol, ALT, AST e creatinina do sangue total foram realizadas utilizando o método enzimático-colorimétrico para determinação em soro, seguindo as recomendações do fabricante (Gold Analisa Diagnóstica LTDA, Belo Horizonte/MG, Brasil). Resultados O grupo VENENO/24 horas apresentou os níveis mais elevados de colesterol. Em geral, os grupos VGA apresentaram níveis inferiores de colesterol, que os respectivos grupos veneno. Os níveis de creatinina encontrados nos experimentos estão dentro dos limites normais (MITRUKA & RAWNSLEY, 1977). Os valores de AST encontrados nos experimentos encontram-se acima dos níveis normais para estes animais. Os grupos veneno/24 horas, VGA/24 horas e VGA/3dias apresentaram os níveis mais elevados desta enzima. Os níveis de ALT medidos nos experimentos encontram-se, sensivelmente, acima dos níveis normais encontrados na literatura. Discussão Com relação aos níveis de colesterol, apenas o grupo veneno/24 horas apresentou níveis acima dos limites tidos como normais para estes animais. Como o fígado exerce um papel chave no metabolismo lipoprotéico, distúrbios hepáticos estão associados com alterações nos perfis lipoprotéicos (SEIDEL, 1987). Os níveis sanguíneos de colesterol podem estar elevados no hipotireoidismo, em obstruções biliares, diabetes mellitus, pancreatite ou quando são utilizadas dietas ricas em carboidratos e gorduras e em casos de doenças genéticas relacionadas com a síntese de apolipoproteínas plasmáticas. Níveis diminuídos são encontrados nas seguintes situações: desnutrição, lesão-hepato-celular, hipertireoidismo e, em casos de doenças genéticas relacionada com a diminuição da síntese de apolipoproteínas do plasma (CHANG, 1986). Os níveis de creatinina encontrados nos experimentos estão dentro dos limites normais (MITRUKA; RAWNSLEY, 1977). Pesquisas mostram que nos casos de envenenamento botrópico, é comum a ocorrência de hipoproteinemia, aumento da concentração de uréia, creatinina e creatinafosfoquinase, em decorrência da ação do veneno (LAGO, 1996; SALVINI, 2001). O aumento de ureia e creatinina no soro ocorre por disfunção renal, pois os rins ficam com dificuldade de excretar catabólitos nitrogenados, em decorrência de disfunção renal, provocada pela ação nefrotóxica do veneno. No entanto, Lago (1996) não observou hipoproteinemia e elevação sérica da concentração de creatinina em bovinos intoxicados com veneno de cascavel. Os valores de AST e ALT encontrados nos experimentos encontram-se acima dos níveis normais para estes animais. No caso da enzima AST houve um aumento considerável nos níveis, enquanto que os níveis de ALT aumentaram sensivelmente. Sabe-se que lesões ou destruição das células hepáticas liberam essas enzimas para a circulação (MOTTA, 2003). Em caso de dano hepatocelular leve a forma predominante no soro é a citoplasmática (ALT), enquanto que em casos de lesões graves, há liberação da enzima mitocondrial (AST), havendo uma elevação da relação AST/ALT, assim o Índice ou Quociente DeRitis (relação AST/ALT), nestes casos apresenta um valor maior que 1 (MOTTA, 2003). Conclusão Os níveis de colesterol encontrados nos experimentos, com exceção do grupo veneno 24 horas, se encontram dentro dos parâmetros normais para estes animais. Porém, níveis elevados das enzimas AST e ALT, indicam que houve lesão hepatocelular nos animais submetidos ao experimento (MOTTA, 2003; VIEIRA, 2003). Com relação aos níveis de creatinina encontrados, esperava-se que houvesse um aumento na concentração desta, em virtude da ação nefrotóxica do veneno (LAGO, 1996ç; SALVINI, 2001), o que não ocorreu. Referências bibliográficas CASTRO , DE I. Estudo da toxicidade das peçonhas crotálicas e botrópicas, no acidente ofídico, com ênfase a toxicidade renal. O mundo da saúde, v. 30 (4), p. 644-653, 2006. CHANG, l.; CLIFTON, P.; BARTER, P.; MACKINNON, M. High density lipoprotein subpopulations in chronic liver disease. Hepatology, v.6, n.1, p.46-49, 1986. DOURADO, D. M.; SILVA, B.A.K de.; FERMIANO, M.H.; GUILHERMINO, J. F. de.; MATIAS, R. Efeito da Planta Sebastiana hispida no Fígado de Ratos Injetados com Veneno de Bothrops moojeni, Correlacionados com Marcadores Enzimáticos e Laser de Baixa Potencia. Revista Fitos, [S.l.], v. 7, n. 03, out. 2013. DOURADO, D. M.; MATIAS, R.; BARBOSA - FERREIRA, M.; DA SILVA, B. A. K.; MULLER, J. A. I.; VIEIRA, F. W.; CRUZ-HÖFLING, M. A. Effects of photobiomodu-lation therapy on Bothrops moojeni snake-envenomed gastrocnemius of mice using enzy-matic biomarkers. Lasers in Medical Science, v. 32, n. 6, p. 1357-1366, Aug. 2017. HUDELSON, S.; HUDELSON, P. Pathophysiology of snake envenomization and evalua-tion of treatments-part I. Comp. Contin. Educ. Pract. Vet.; v. 17, n. 7, p.889-896, 1995a. HUDELSON, S; HUDELSON, P. Pathophysiologyof snake envenomization and evalua-tion of treatments-part II. Comp. Contin. Educ. Pract. Vet.; v. 17, n. 8,p. 1035-1040, 1995b. LAGO, L.A. Avaliação clínica e laboratorial de bovinos submetidos ao envenenamento crotálico experimental – Crotalus durissus terrificus – Laurenti, 1768 –crotamina positivo. 1996. 85f. Dissertação (Mestrado em Medicina Veterinária) –Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte. MAGRO, M. C. da Silva.; VATTIMO, M. De F. Avaliação da Função Renal: Creatinina e outros Biomarcadores. Revista Brasileira de Terapia Intensiva, V.12, n.2, p.182-5, 2007. MANDELBAUM, F. R. Snake venom hemorrhagins. Memórias do Instituto Butantan,v.52,supl, p35-36, 1990. Ministério da Saúde. Acidentes por animais peçonhentos – Serpentes, 2017. MITRUKA , B. M . & RAWNSLEY, H.M. Clinical Biochimical and Hematological Ref-erence Values in Normal Experimental Animals. New York, Masson Publishing, 1977. MOTTA, V.T. Bioquímica clínica para o laboratório. 4.ed. Porto Alegre: Médica Missau, 2003. 419p. SALVINI, T. F.; AMARAL, A.C.; MIYABARA, E.H. Systemic skeletal muscle necrosis induced by crotoxin. Toxicon, v. 39, ed.8, p.1141-49, 2001. SANTANA, V.P.T., BARROS, J.O, SUCHARA, E.A.. Aspectos clínicos e epidemiológicos relacionados a acidentes com animais peçonhentos. Revista de Ciências Médicas e Biológicas. v.14(2), - p.153-59, 2015. SEIDEL, D. Lipoproteins in liver disease. J. Clin. Chem. Cli. Biochem. , v.25, p. 541, 1987. WHITE. J, MEIER, J. Handbook of Clinical Toxicology of Animal Venoms and Poisons. Boca Raton, Nov. 2017, 768 pg.

Título do Evento: CONINS - I Congresso Interdisciplinar em Saúde do MS
Cidade do Evento: Campo Grande
Título dos Anais do Evento: Anais do I CONINS - Congresso Interdisciplinar em Saúde do MS
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital
DOI

Como citar

FONTOURA, Juliana Topazio Ribeiro et al.. : NÍVEIS SÉRICOS DE ENZIMA HEPÁTICA E RENAL EM RATOS, INJETADOS COM VENENO DE BOTHROPS MOOJENI E TRATADOS COM LASER DE BAIXA POTÊNCIA.. In: Anais do I CONINS - Congresso Interdisciplinar em Saúde do MS. Anais...Campo Grande(MS) Unigran Capital, 2019. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/conins/189825---NIVEIS-SERICOS-DE-ENZIMA-HEPATICA-E-RENAL-EM-RATOS-INJETADOS-COM-VENENO-DE-BOTHROPS-MOOJENI-E-TRATADOS-COM-LAS. Acesso em: 08/05/2025